石蜡包埋制片步骤
石蜡切片制作流程
1. 取材:取新鲜组织固定于 4%多聚甲醛 24h 以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内;
2. 脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精 1h-85%酒精 1h-95%酒精 1h-95%酒精 1h-无水乙醇 I 1h-无水乙醇 II 1h-二甲苯Ⅰ 1h-二甲苯 Ⅱ 1h-蜡 I 1h-蜡 II 1h;
3. 包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框,于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4. 切片:将修整好的蜡块,放入-20℃冻台冷却,再将冷却的蜡块置于石蜡切片机切片,厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃ 温水上将组织展平,载玻片将组织捞起,60℃ 烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
包埋图片展示
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