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夹心法elisa的优势

  TIEM: 2023-06-28      186
夹心法elisa的优势

夹心法elisa的优势

ELISA大致分为五种类型:直接法、间接法、竞争法、夹心法、捕获包被法。在ELISA试剂盒中用得比较多的是双抗体夹心法、竞争法和间接法。那么接下来酶标小编就先和你们谈谈双抗夹心法吧。

双抗体夹心法中抗原的2个不同的抗原表位被两个抗体-捕捉抗体和检测抗体,分别结合。捕捉抗体固定于载体即酶标板上,检测抗体通过结合抗原进行显色分析。应用于双抗体夹心法检测的捕捉抗体通常是单抗,偶尔有用多抗做为捕捉抗体的情况,但很少见,因为以多抗作为捕捉抗体容易出现交叉反应而降低特异性。检测抗体通常为多抗,在科研试剂盒中经常用到生物素标记的山羊多抗,再让生物素标记的多抗与HRP标记的亲和素或者链霉亲和素结合,然后再加HRP也就是辣根过氧化物酶的底物,通常是TMB反应显色,这种方法是在传统的HRP酶标记抗体的双抗体夹心法ELISA中引入了生物素-亲和素放大系统。

 

夹心法ELISA与其他ELISA方法相比的优点包括但不限于:

1. 夹心法ELISA测试的灵敏度比标准的直接或间接ELISA测试高约2-5倍。

2. 与直接法ELISA测试相比,夹心法ELISA试剂盒对目标抗原具有更高的特异性,因为需要使用两种抗体进行捕获和检测。

3. 复杂成分样品可用于夹心法ELISA,因为样品在测试前不需要纯化。

4. 夹心法ELISA检测还允许更灵活的检测方法(可以使用直接或间接方法)。

 

 

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