| 免疫荧光双标染色 | 货号 | 1562 |
| 应用 | 病理检测 |
| 实验周期 | 3-5个工作日 |
| 价格 | 90.00￥/张 |
免疫荧光双标实验步骤：
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ6min- 无水乙醇Ⅱ6min-Ⅱ-95%乙醇6min-85%乙醇6min-75%乙醇6min-双蒸水2min。
2、抗原修复：组织切片置于盛满柠檬酸（PH6.0)抗原修复液的高压锅内进行抗原修复，喷气计时2.5min， 自然冷却后将玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 5min。
3、 BSA 或者血清封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内滴加用 5%BSA，室温封闭 1h。
4、 加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗（两种不同种属来源的一抗），切片平放于湿盒内 4°C 孵育过夜。（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）
5、 加二抗：玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 8min。切片稍甩干后在圈内滴加与种属对应的二抗，覆盖组织，室温孵育120min。之后玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 8min。
6、 DAPI染核：滴加 DAPI，室温孵育10min，之后玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 6min。
7、 封片：甘油封片。
8、荧光显微镜观察
