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免疫荧光单标染色

  TIEM: 2022-03-28      313
免疫荧光单标染色


免疫荧光
单标染色
货号1561
应用病理检测
实验周期2-3个工作日
价格80.00/









肠-mpo-1_副本.jpg 脑-GFAP-2_副本.jpg


细胞荧光单标-1_副本.jpg 荧光单标2-1_副本.jpg


石蜡切片免疫组化实验步骤:

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ6min- 无水乙醇6min--95%乙醇6min-85%乙醇6min-75%乙醇6min-双蒸水2min

2抗原修复:组织切片置于盛满柠檬酸(PH6.0)抗原修复液的高压锅内进行抗原修复,喷气计时2.5min, 自然冷却后将玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 5min。

3 BSA 或者血清封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走,在圈内滴加用 5%BSA,室温封闭 1h

4、 加一抗:轻轻甩掉封闭液,在切片上滴加按一定比例配好的一抗,切片平放于湿盒4°C 孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)

5 加二抗:玻片置于 PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 8min。切片稍甩干后在圈内滴加与种属对应的二抗,覆盖组织,室温孵育120min之后玻片置于 PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 8min

6 DAPI染核滴加 DAPI,室温孵育10min,之后玻片置于 PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 6min

7 封片:甘油封片。

8荧光显微镜观察


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