elisa实验中会用到哪些试剂
在ELISA(酶联免疫吸附测定)实验中,会用到以下几种试剂:
1、酶标板:通常为96孔板,用于吸附抗原或抗体。
2、抗体:包括特异性抗体,如多克隆抗体。
3、酶标二抗:与抗体结合的酶标记抗体,如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)。
4、底物:常用的底物包括邻苯二胺(OPD)或对硝基苯磷酸酯(pNPP)。
5、终止液:通常为硫酸,用于终止酶促反应。
6、洗涤液:如磷酸盐缓冲液(PBS)用于清洗酶标板。
7、抗体稀释液:一般使用PBS或含小牛血清的PBS。
8、酶标二抗稀释液:用于稀释酶标二抗的溶液。
9、抗原或抗体稀释液:可以是PBS、PBST、封闭液或生理盐水。
10、阳性对照品和阴性对照品(定性测定中),以及参考标准品和控制血清(定量测定中)。
以上试剂共同构成了ELISA实验的基本试剂盒,用于检测样本中的特定抗原或抗体。实验过程中,样本、抗体、酶标二抗等试剂会按照特定的顺序加入酶标板中,并通过洗涤、孵育、加底物、终止反应等步骤来完成整个检测过程。
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